檢測器的主要性能:檢測器是液相色譜儀的三大關(guān)鍵部件之一.它的作用是把色譜洗脫液中組分的量(或濃度)轉(zhuǎn)變成電信號.按其適用范圍檢測器可分為通用型和專屬型兩大類.專屬型檢測器只能檢測某些組分的某一性質(zhì),紫外檢測器,熒光檢測器屬于這一類.它們只對有紫外吸收或熒光發(fā)射的組分有響應(yīng).通用型檢測器檢測的是一般物質(zhì)具有的性質(zhì).示差折光和蒸發(fā)光散射檢測器屬于這一類.
(一)紫外檢測器
紫外檢測器是液相色譜中應(yīng)用zui廣泛的檢測器.它靈敏度較高,噪音低.線性范圍寬,對流速和溫度的波動不靈敏,還適用于制備色譜.但它只能檢測有紫外吸收的物質(zhì).而且流動相也有一定的限制.即流動相的截止波長應(yīng)小于檢測波長.
紫外檢測器的工作原理是朗伯-比爾定律.
(二)熒光檢測器
熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器高,選擇性好,但只適合于能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)的檢測,許多藥物和生命活性物質(zhì)具有天然熒光,能直接檢測.通過熒光衍生化可以使本來沒有熒光的化合物轉(zhuǎn)變成熒光衍生物,從而擴大了熒光檢測器的應(yīng)用范圍.
熒光檢測器的原理與熒光分析法相同,化合物受紫外光激發(fā)后,發(fā)射出比激發(fā)光波長更長的光,稱為熒光或發(fā)射光.
(三)蒸發(fā)光散射檢測器
蒸發(fā)光散射檢測器是20世紀(jì)90年代出現(xiàn)的通用型檢測器.它適用于檢測揮發(fā)性低于流動相的組分,主要用于檢測糖類,脂肪酸,磷脂,維生素,氨基酸,甘油三酯及甾體等.對各物質(zhì)有幾乎相同的響應(yīng).但是,其靈敏度比較低,尤其是有紫外吸收的組分.此外,流動相必須是揮發(fā)性的,不能含有緩沖鹽等.
其工作原理是:將色譜住流出液引入霧化器與通入的氣體混合形成均勻的微小液滴.經(jīng)過加熱的漂移管,蒸發(fā)除去流動相,而試樣組分形成氣溶膠,然后進入檢測室.用強光或激光照射氣溶膠,產(chǎn)生光散射,用光二極管檢測散射光.
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