液相色譜法測定動物組織中抗生素殘留量

   液相色譜法測定動物組織中抗生素殘留量采用EDTA+磷酸（1+1）-三氯乙酸提取，應用C18固定柱富集、凈化，以取得較好的分離效果。然后以保留時間定性，以峰面積定量。具體檢測方法如下：

樣品的提取

    四環(huán)素、土霉素的提取。稱取10.0g樣品于100mL比色管中，加入0.01mol/L EDTA二鈉-0.04mol/l磷酸（1:1）混合液30mL，搖勻，再加入50%三氯乙酸2mL，搖勻，用EDTA-磷酸混合液定容至50mL，樣品液全部轉移至勻漿瓶中，用組織勻漿機高速勻漿1min，勻漿液于45℃以下水浴保溫15min，待靜置分層后，離心10min（2500r/min），上層清液過濾，收集濾液25mL備用。用2mL甲醇潤濕Sep-Pak C18柱，字啊用10ml蒸餾水置換，然后依次用5%EDTA二鈉水溶液5mL、10mL蒸餾水流過。將濾液通過Sep-Pak C18柱，分4次用10mL蒸餾水沖洗，加10mL甲醇溶出，溶出液用液相色譜儀分析。

氯霉素的提取。

    稱取10.0g樣品于100mL比色管中，加入磷酸鹽緩沖液30mL，搖勻，慢慢加入50%三氯乙酸溶液，用磷酸鹽緩沖溶液定容至50mL，樣品液全部轉移至勻漿瓶，用組織勻漿機高速勻漿1min，室溫下放置15min，過濾，收集濾液，經0.45μm濾膜再過濾，取濾液進行液相色譜分析。

    測定后，比較其峰面積，利用外標法定量。